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分光光度计的使用需要注意哪些细节呢?

点击次数:662 发布时间:2019-12-18
  分光光度计主要采用分光光度法,利用物质对某种波长的光具有选择性吸取的特性以鉴别物质或测定其含量。能够快速准确的测量核酸、蛋白质、细胞溶液的浓度。每次测量所需要的样品量仅需0.5至2ul即可。直接将样品点于加样板上。无需比色杯或毛细管等附件。测量结束后,可以选择直接将样品擦去或者再用移液器回收样品。所有步骤简单快速,一气呵成。
  使用分光光度计的注意事项都是什么?
  1)为了防止光电管疲劳:
  不测定时必须将比色皿暗箱盖打开,使光路切断,以延长光电管使用寿命。
  2)比色皿的使用方法:
  ①拿比色皿时:
  手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
  ②清洗比色皿时:
  一般先用水冲洗,再用蒸馏水洗净。如,比色皿被有机物沾污,可用盐酸-乙醇混合洗涤液(1:2)浸泡片刻,再用水冲洗。不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗比色皿,以免损坏。也不能用毛刷清洗比色皿,以免损伤它的透光面。每次做完实验时,应马上洗净比色皿。
  ③比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干:
  以保护透光面。
  ④测定有色溶液吸光度时:
  一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次,以免改变有色溶液的浓度。另外,在测定一系列溶液的吸光度时,通常都按由稀到浓的顺序测定,以减小测量误差。
  ⑤在实际分析工作中:
  通常根据溶液浓度的不同,选用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。
  分光光度计的特点是只有一条光束。通过交换参比和样品的位置,使其分别进入光路。在参比(溶剂)进入光路时,调零。然后将样品进入光路的信号和参比信号进行比较,就可在显示器上读出样品的透过率和吸光度。分光光度计由于在每个波长都需要变换参比和样品的位置,所以只能手动,不能扫描吸取光谱。它的结构比较简单,使用也有一定限制,但如配置程序控制和打印装置,则对一些常规的定量测定还是比较适用的。
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